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ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠選擇合適的實(shí)驗(yàn)操作與保溫條件
更新時(shí)間:2017-11-21   點(diǎn)擊次數(shù):806次

ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠如何保溫:
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2小時(shí),產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng),可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應(yīng)4℃更為*,在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過(guò)夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng),在ELISA試劑盒中一般不予采用。
實(shí)驗(yàn)條件:
1. 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
2. ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠包被抗體或抗原的選擇:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
3. 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法”,在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
Schizandrol A    五味子酯甲    HPLC≥98%    20mg/支
Schisandrol B    五味子醇乙    HPLC≥98%    20mg/支
Nicotinamide    煙酰胺    HPLC≥99.5%    50mg/支
Crocin    西紅花苷(藏紅花素,番紅花苷)    Standard(標(biāo)準(zhǔn))    20mg/支
Crocin I    西紅花苷I    HPLC≥97%    20mg/支
Crocin II    西紅花苷II    HPLC≥98%    20mg/支
Morin    桑色素    HPLC≥98%    20mg/支
D-(−)-Quinic acid    D-(-)-奎寧酸    ≥98%    20mg/支
catalpol    梓醇    HPLC≥98%    20mg/支
phloridzin    根皮苷    HPLC≥99%    20mg/支
ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠

 

 

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