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小鼠17羥皮質類固醇elisa檢測試劑盒?操作步驟
更新時間:2021-11-02   點擊次數(shù):772次

小鼠17羥皮質類固醇elisa檢測試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

小鼠胸腺活化調節(jié)趨化因子(mouse TARC)

小鼠凝血酶抗凝血酶復合物(mouse TAT)

小鼠組織因子(mouse TF)

小鼠組織因子抑制物(mouse TFPI)

小鼠轉化生長因子-β1(mouse TGF-β1)

小鼠轉化生長因子-β2(mouse TGF-β2)

小鼠可溶性粒細胞靶受體(mouse sTREM-1)

小鼠端粒酶(mouse Telomerase)

小鼠Toll樣受體-2(mouse TLR-2)

小鼠Toll樣受體-4(mouse TLR-4)

小鼠基質金屬蛋白酶抑制劑-1(mouse TIMP-1)

小鼠基質金屬蛋白酶抑制劑-2(mouse TIMP-2)

小鼠腫瘤壞死因子-a(mouse TNF-a)

小鼠腫瘤壞死因子-b(mouse TNF-b)

小鼠腫瘤壞死因子-r(mouse TNF-r)

小鼠組織纖溶酶原激活劑(mouse t-PA)

小鼠轉鐵蛋白(mouse Transferrin)

小鼠胸腺基質淋巴細胞生成素(mouse TSLP)

小鼠血栓烷B2(mouse TXB2)

小鼠可溶性腫瘤壞死因子-a受體(mouse sTNF-aR)

小鼠組織多肽抗原(mouse TPA)

小鼠血小板生成素(mouse TPO)

小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(mouse TRAIL/APO 2L)

小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體1(mouse TRAIL R1)

小鼠凝血酶敏感蛋白-1(mouse TSP-1)

小鼠血栓調節(jié)蛋白(mouse TM)

小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(mouse uPA)

小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(mouse uPA-R)

小鼠血管細胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)

小鼠血管內皮生長因子(mouse VEGF)

小鼠血管內皮細胞生長因子B(mouse VEGF-B)

小鼠血管內皮細胞生長因子C(mouse VEGF-C)


 

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