免费人妻精品一区二区三区,精品人妻一区二区三区浪潮在线,最近中文版字幕2019日本,亚洲一久久久久久久久

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 細(xì)胞株的培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇
細(xì)胞株的培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇
更新時間:2011-12-27   點(diǎn)擊次數(shù):1497次

細(xì)胞株的培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇
1)細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代 培養(yǎng): 用于檢測細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)細(xì)胞因子依賴細(xì)胞株還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),3~4天傳代一次。 懸浮生長細(xì)胞的傳代: 直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。 帖壁生長細(xì)胞的傳代: 吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌細(xì)胞一次,加入消化液,在37℃中消化約3~10分鐘,待細(xì)胞開始脫落時,倒去消化液,加入新鮮培養(yǎng)液,懸浮和吹打分散細(xì)胞。也可以待細(xì)胞*消化脫落,500×g離心5分鐘,去除消化液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞。1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
2)細(xì)胞株的凍存: 1. 取培養(yǎng)2~3天生長旺盛的細(xì)胞,用細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞配成2×106~2×107/ml。 2. 在1ml細(xì)胞凍存管中加入0.5ml細(xì)胞懸液,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封。置4℃ 1小時,-20℃ 2小時,然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上過夜后浸入液氮中。
3)細(xì)胞株的復(fù)蘇: 復(fù)蘇時,從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細(xì)胞。將細(xì)胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞待細(xì)胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng);帖壁細(xì)胞則培養(yǎng)2~3小時,待細(xì)胞帖壁后,倒去培養(yǎng)液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。也可以在加入新鮮培養(yǎng)液以后,500×g離心5分鐘,去上清液,加入新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
 

 

化工儀器網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
一 级 黄 色 片免费网站| 久久人妻少妇嫩草av无码| av无码免费播放| 国产小受呻吟GV视频在线观看| 色翁荡熄又大又硬又粗又视频| 久久婷婷五月综合国产| 国产女人aaa级久久久级| 国产精品国产三级在线专区| 国产日韩一区二区三免费高清| 久久精品无码一区二区无码| 日本最大但人文艺术第一组| 国产精品毛片无码| 国产精品久久久久久亚洲| 人妻妺妺窝人体色www聚色窝| 特级毛片a片久久久久久| 亚洲成a人片在线观看www| 日韩性做爰免费a片aa片| 亚洲性色AV私人影院无码| 日本少妇做爰全过| 无码国产69精品久久久久网站| 女人国产香蕉久久精品软件| 午夜天堂精品久久久久| 巨大欧美黑人xxxxbbbb| 公交车挺进朋友人妻的身体里| 亚洲精品无码久久毛片| 久久人妻无码精品一区二区三区| 久久婷婷五月综合色丁香| 臭小子我是你岳...你不能视频 | 姐姐真漂亮高清在线观看| 国产精品久久毛片a片| 国产精品久久久久久爽爽爽床戏| 精品久久8x国产免费观看| 男人靠女人免费视频网站 | 国产一区二区三区成人| 色拍拍拍免费视频在线| 狠狠综合久久AV一区二区三区| 欧美老熟妇乱XXXXX| 国产精品秘入口18禁麻豆免会员| 精品国产一区二区三区AV性色| freexx性黑人大战欧美视频| 无码国产一区二区三区四区公司|