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lb培養(yǎng)基配方與tb培養(yǎng)基配方之間的經(jīng)驗(yàn)
更新時(shí)間:2012-08-28   點(diǎn)擊次數(shù):3172次

lb培養(yǎng)基配方與tb培養(yǎng)基配方之間的經(jīng)驗(yàn)

LB培養(yǎng)基和TB培養(yǎng)基這兩種培養(yǎng)基名字有點(diǎn)像,它們之間的區(qū)別在哪呢?首先是用途上,LB經(jīng)常用來(lái)預(yù)培養(yǎng)菌種,而TB培養(yǎng)基則用于慢病毒載體等多種實(shí)驗(yàn)中,另外,兩者的配方也是大有不同的。一起了解一下吧。

TB培養(yǎng)基的配方

去離子水加至 900 ml 胰蛋白胨 12 g 酵母提取物 24 g 甘油 4 ml

搖動(dòng)容器使溶質(zhì)*溶解,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。當(dāng)溶液冷卻至 60°C或 60°C以下時(shí)加入100 ml無(wú)菌的0.17 nol/L KH2PO4,0.17 nol/L K2HPO4(該溶液的配置方法是:用90 ml 去離子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,*溶解后,用去離子水定容至 100 ml,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。)

LB培養(yǎng)基的配方

10g NaCl 10g 蛋白胨 5g酵母粉 加去離子水至1L 調(diào)PH 7.0-7.2 分裝 滅菌 即可用之

配方區(qū)別:

TB培養(yǎng)基,Terrific肉湯(Terrific Broth,TB)

1. 去離子水加至 900 ml 2. 胰蛋白胨 12 g, 3. 酵母提取物 24 g, 4. 甘油 4 ml

搖動(dòng)容器使溶質(zhì)*溶解,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。當(dāng)溶液冷卻至 60°C或 60°C以下時(shí)加入100 ml無(wú)菌的0.17 nol/L KH2PO4,0.17 nol/L K2HPO4(該溶液的配置方法是:用90 ml 去離子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,*溶解后,用去離子水定容至 100 ml,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。)

LB培養(yǎng)基的配方如下:

胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L

酵母提取物(Yeast extract) 5g/L

氯化鈉(NaCl) 5g/L

另外根據(jù)經(jīng)驗(yàn)值用NaOH調(diào)節(jié)該培養(yǎng)基的pH,使其達(dá)到7.4(該pH適合目前使用zui廣的原核表達(dá)菌種E.coli的生長(zhǎng))

其他區(qū)別:TB培養(yǎng)基是一種通用培養(yǎng)基,用于各種微生物的培養(yǎng)。LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱,生化分子實(shí)驗(yàn)中一般用該培養(yǎng)基來(lái)預(yù)培養(yǎng)菌種,使菌種成倍擴(kuò)增,達(dá)到使用要求.培養(yǎng)的菌種一般是經(jīng)過(guò)改造的無(wú)法在外界環(huán)境單獨(dú)存活和擴(kuò)增的工程菌.

zui后,值得注意的是,LB培養(yǎng)基配制好后,一定要在冷卻前加好抗生素。配TB培養(yǎng)基時(shí),zui后分開滅菌,否則配出來(lái)的培養(yǎng)基容易因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)缺失而發(fā)黑。

 

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