免费人妻精品一区二区三区,精品人妻一区二区三区浪潮在线,最近中文版字幕2019日本,亚洲一久久久久久久久

技術文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術文章 > 人神經(jīng)元特異性烯醇化酶NSE試劑盒原理分析
人神經(jīng)元特異性烯醇化酶NSE試劑盒原理分析
更新時間:2015-03-19   點擊次數(shù):670次

人神經(jīng)元特異性烯醇化酶NSE試劑盒原理分析

本試劑僅供研究使用 標本:血清或血漿

試驗原理:
人神經(jīng)元特異性烯醇化酶NSE試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知NSE濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將NSE和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NSE的濃度呈比例關系。

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
人神經(jīng)元特異性烯醇化酶NSE血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:人神經(jīng)元特異性烯醇化酶NSE不與人其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的NSE標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的NSE含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-80ng/ml

4、敏感度: 0.1 ng/ml

 

化工儀器網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
亚洲AV无码乱码在线观看代蜜桃| 丰满熟妇乱又伦精品| 国产亚洲精品久久久久久小舞| 精品国品一二三产品区别在线观看| 国产老熟女视频一区二区| 麻豆精品久久久久久久99蜜桃| 精品国产一区二区三区AV性色| 免费无码中文字幕A级毛片HD| 欧美 亚洲 国产 另类| 自拍偷自拍亚洲精品被多人伦好爽| 成年免费a级毛片免费看无码 | 久久久久久久久无码精品亚洲日韩| 国产69精品久久久久9999不卡| 农村欧美丰满熟妇XXXX| 国产亚洲精久久久久久无码| 人妻少妇精品无码专区动漫 | 人妻系列无码专区免费视频| 美女视频黄8频全软件| 国产18禁黄网站免费观看| 丰满熟妇人妻av无码区| 99无码熟妇丰满人妻啪啪| 国产麻豆一区二区三区精品视频| 亚洲国产成人精品无码区在线| 国产免费又色又爽粗视频| 色费女人18毛片a级毛片视频| 西瓜视频高清在线观看免费| 国产一区二区三区四区精华 | 少妇大叫太大太深受不了| 极品hd无码国模国产在线观看| 成年美女黄网站色大片免费看| 人妻熟女ΑⅤ一区二区三区| 日本又黄又爽gif动态图| 亚洲欧洲∨国产一区二区三区| 日本少妇被爽到高潮无码| 99re66热这里只有精品3| 国产乱人伦精品一区二区| 精品久久人人妻人人做精品| 亚洲乱亚洲乱妇24p| 国产精品三级一区二区| 天堂av无码大芭蕉伊人av不卡| 婷婷久久香蕉五月综合加勒比|